EVALUACIÓN DE NUEVAS TÉCNICAS EN DBS

Los DBS (por sus siglas en inglés, "dried blood spots" o “dried blood samples”), también conocidos como muestras de sangre seca, son un método de recolección, transporte y almacenamiento de muestras de sangre muy útil en la investigación y el diagnóstico de enfermedades.

En lugar de recolectar muestras de sangre en tubos de ensayo tradicionales, que requieren refrigeración, ocupan más espacio, y no se pueden almacenar demasiado tiempo, los DBS implican colocar un par de gotas de sangre en una tarjeta de papel de filtro especial, y dejar que se sequen. Una vez que la muestra está seca, se puede almacenar a temperatura ambiente y transportar con facilidad sin la necesidad de refrigeración.

Este método no es nuevo, la idea de recolectar muestras biológicas en una tarjeta de celulosa se originó hace casi un siglo. Sin embargo, aun hace falta investigar más en su uso para poder establecer protocolos que estandaricen su uso y optimicen su potencial.

Facilidad para la recolección de muestra: proceso menos invasivo

En lugar de requerir que la muestra de sangre sea extraída por venopunción (utilizando una aguja para extraer sangre venosa), los DBS se pueden preparar con un par de gotas de sangre obtenidas por un pequeño pinchazo en la yema del dedo o el talón (en el caso de bebés), obteniendo sangre capilar. Existen situaciones en las que puede resultar difícil extraer sangre por venopunción como es en niños recién nacidos, ancianos o pacientes crónicos, en estos casos el DBS es una buena alternativa. Además, la extracción de sangre tradicional debe ser realizada por un profesional sanitario, en cambio en los DBS, el pinchazo es tan sencillo (similar al de una aguja para medir glucosa en sangre) que puede realizarlo personal no entrenado o incluso el propio paciente, permitiendo la autotoma de muestra, lo que aporta comodidad y privacidad al paciente.

Facilidad para su almacenamiento y transporte: lugares remotos

Las tarjetas de DBS pueden almacenarse a temperatura ambiente y pueden transportarse sin necesidad de refrigeración, lo que las hace especialmente útiles en entornos donde el acceso a la refrigeración es limitado. Por ello, su uso permite la recolección de muestras en lugares remotos y su envío a laboratorios centrales para su análisis. Esto es una gran ventaja cuando se trata de obtener muestras de lugares remotos en países en vías de desarrollo, comunidades con difícil acceso a centros sanitarios o poblaciones con riesgo de exclusión. Además, al igual que una muestra tradicional, los DBS se pueden congelar. Para la investigación pueden requerirse un gran número de muestras, al ocupar mucho menos sitio que un tubo de ensayo tradicional, pueden almacenarse muchas más tarjetas de DBS en congeladores de, por ejemplo, un biobanco. No hay que olvidar, que por su facilidad de almacenamiento, es más factible mantener los DBS más tiempo en el laboratorio, lo que resulta útil cuando se requiere repetir la prueba para comprobar el resultado o para investigar otro diagnóstico después de algún tiempo

Flexibilidad de análisis en DBS: más que diagnóstico

Los DBS se pueden emplear tanto para el diagnóstico de enfermedades infecciosas, como de enfermedades genéticas y monitorización de fármacos entre otros. Los DBS se han utilizado durante décadas para la detección del VIH en países en desarrollo y regiones remotas donde el acceso a pruebas de laboratorio tradicionales es limitado. También pueden detectarse otras infecciones víricas como la hepatitis C y B, así como parasitarias, como chagas o malaria. En DBS se pueden realizar tanto pruebas moleculares, como la PCR, como pruebas para la detección de niveles de antígenos o anticuerpos. Ésta última también permite conocer el estado vacunal de un niño para saber si está inmunizado contra enfermedades potencialmente prevenibles mediante vacunación.
Los DBS se utilizan a menudo para el análisis genético, incluyendo la detección de enfermedades metabólicas hereditarias y trastornos del neurodesarrollo en recién nacidos. La recolección de muestras de DBS se realiza generalmente en el momento del nacimiento, permitiendo una detección temprana y un tratamiento oportuno.
Los DBS se utilizan cada vez más en la monitorización de niveles de fármacos en pacientes con enfermedades crónicas. La recolección de muestras de DBS es menos invasiva que la recolección de muestras de sangre tradicionales y permite una monitorización más frecuente y menos costosa.

Existen algunas desventajas en el uso de DBS. Debido a que las muestras de sangre seca pueden ser menos estables que las muestras de sangre líquida, pueden producirse errores en los resultados si la muestra no se recolecta y se almacena correctamente. Además, la cantidad de sangre que se puede recolectar con DBS es limitada, lo que puede ser un problema en casos donde se necesitan grandes volúmenes de sangre para realizar ciertas pruebas. Otro problema es que la mayoría de pruebas diagnósticas no contemplan el uso de DBS, y los puntos de corte que emplean para establecer la diferencia entre un resultado negativo y uno positivo no están adaptados al formato de DBS. Finalmente, los DBS requieren una preparación previa antes de que la muestra sea introducida en la máquina empleada para el diagnóstico, este proceso aun no está estandarizado y el personal debe ser entrenado para obtener unos resultados fiables.

A pesar de estas desventajas, los DBS son una herramienta valiosa en la investigación y el diagnóstico de enfermedades, especialmente en entornos donde el acceso a la refrigeración es limitado o donde se requiere la recolección de muestras en lugares remotos. Con la tecnología adecuada y los procedimientos adecuados de recolección, almacenamiento y procesamiento de muestras, los DBS pueden proporcionar resultados precisos y confiables que son comparables a los obtenidos con muestras de sangre líquida tradicionales ya que han demostrado una alta sensibilidad cuando se procesan adecuadamente.

Por esto es tan importante continuar investigando el uso de DBS, debido a su potencial para mejorar el diagnóstico y tratamiento de enfermedades, especialmente en regiones remotas y países en desarrollo. Además, la investigación en el uso de DBS también puede conducir a nuevas aplicaciones en áreas como la monitorización de la respuesta al tratamiento y el seguimiento de la progresión de enfermedades crónicas.

En EPIMOLVIH llevamos años trabajando con DBS para poder aplicar todo el potencial de este formato de muestra para su aplicación clínica y mejorar el diagnóstico y seguimiento de pacientes, especialmente en poblaciones vulnerables y países en vías de desarrollo:

Estudiando su uso para la detección de diversas enfermedades infecciosas como VIH, VHC y chagas obteniendo datos valiosos para su aplicación en el diagnóstico de estas enfermedades, como la comparación de sensibilidad y especificidad entre DBS y muestras tradicionales y estableciendo los puntos de corte óptimos para la deteccion de RNA, antígenos o anticuerpos en cada técnica serológica o molecular empleada.

Evaluando el uso de DBS para establecer el estado vacunal de niños frente a patógenos vacunables como sarampión, rubeola, paperas, tétanos, difteria y tosferina estableciendo puntos de corte óptimos para este tipo de estudios.

Estudiando el uso de DBS en la detección y cuantificación de distintos marcadores inmunes para la monitorización de la respuesta inmune.

Investigando el efecto del tiempo de almacenamiento a temperatura ambiente sobre la viabilidad de los DBS para su uso diagnóstico, aportando información sobre las mejores condiciones de almacenamiento para el empleo de este tipo de muestras.

Puedes consultar nuestros proyectos y avances en el campo de los DBS y todas nuestras publicaciones en revistas científicas hasta el momento.